伊朗伊斯蘭革命衛隊於7月12日凌晨向約旦、科威特、阿曼和卡塔爾發射導彈與無人機，以回應美軍此前的大規模空襲。這是伊朗首次同時對四個海灣國家發動攻擊，標誌著美伊之間的衝突急劇升級。

伊朗革命衛隊聲稱，其攻擊摧毀了位於約旦的美軍指揮控制中心與無人機機庫，打擊了科威特的美軍雷達站，襲擊了阿曼的美軍航母支援與加油平臺，並摧毀了卡塔爾的戰機維修中心與指揮設施。卡塔爾是自今年4月以來首次遭到伊朗直接攻擊。卡塔爾政府譴責這是“危險的升級”，並稱有三人（包括一名兒童）被墜落彈片擊傷。科威特武裝部隊稱，已攔截進入其領空的“敵對空中目標”。約旦軍方消息稱，三枚從伊朗領土發射的導彈落在約旦境內多個地點，未造成人員傷亡，僅造成輕微物質損失。阿聯酋表示其防禦系統攔截了來自伊朗的導彈與無人機，但國家緊急危機與災害管理局隨後稱，當天早些時候探測到的導彈威脅位於該國境外。阿曼國家通訊社報道，其穆桑達姆地區的目標遭到無人機襲擊，未說明是否有傷亡。

美軍中央司令部稱，已對伊朗境內約140個目標實施打擊，遠超此前兩輪空襲的規模，目標包括導彈與無人機發射陣地、彈藥庫、通信設備及其他設施。美軍稱這些打擊將削弱伊朗威脅民用航運的能力。美國國防部長皮特·赫格塞斯在社交媒體上寫道：“伊朗做出了糟糕的選擇。現在他們付出代價。”伊朗當地媒體報道，一名伊朗海軍軍官在美軍對南部賈斯克港的空襲中喪生。伊朗官方通訊社援引地方官員稱，“伊朗武裝力量海軍中尉哈米德雷扎·德赫加尼在美國昨晚對賈斯克港的犯罪、恐怖襲擊中殉難。”

伊朗最高領袖的一名顧問穆赫辛·雷扎伊表示，霍爾木茲海峽比“數十枚原子彈”更重要，伊朗將保護這條關鍵水道。此前，伊朗因美軍空襲而再次關閉霍爾木茲海峽，並稱已向一艘未經批准航線航行的船隻發出警告射擊並使其起火，迫使船員棄船，一名印度籍船員失蹤。伊朗革命衛隊稱，海峽將保持關閉，直到“美國對地區的干涉結束”。霍爾木茲海峽是全球約五分之一石油運輸的咽喉要道，其通行狀況直接影響全球能源市場。

伊朗首席談判代表穆罕默德·巴吉爾·卡利巴夫在社交媒體上發文稱：“單方面協議的時代結束了。我們告訴過你們：信守承諾，否則付出代價。現實正在敲門。”此前，美伊之間曾達成一項旨在結束自2月28日以來美國與以色列對伊朗軍事行動的停火協議，但美國總統唐納德·特朗普在伊朗發動最新報復性打擊後宣佈該停火協議失效，不過仍為繼續談判留有餘地。以色列未參與美伊談判，據報正在等待華盛頓的批准以重新加入戰鬥。